2012-1213
一、分析靈敏度1、檢測(cè)系統(tǒng)可檢測(cè)的樣本中zui低分析物濃度;2、檢測(cè)低限:定性含義;3、功能靈敏度:定量含義。二、檢測(cè)低限(LLD)1、定義:樣本單次檢測(cè)可以達(dá)到的非空白檢測(cè)響應(yīng)量對(duì)應(yīng)的分析物量。檢測(cè)系統(tǒng)或方法對(duì)小于或等于檢測(cè)低限的分析物量只能報(bào)告“無(wú)分析物檢出”。2、計(jì)算:通常估計(jì)95%和97.5%的兩種可能性①95%可能性:LLD=X(空白)+2×SD(空白)②99.7%可能性:LLD=X(空白)+3×SD(空白)三、功能靈敏度(FS)1、定義:以天間重復(fù)CV為20%時(shí)對(duì)...
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2012-1210
一、試劑空白吸光度每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,其改變往往提示該試劑的變質(zhì);原則上,吸光度上升的反應(yīng),其試劑空白吸光度越低越好,不能超過(guò)一個(gè)高限。反之亦然;試劑空白吸光度限值,常作為程序參數(shù)輸入儀器,如經(jīng)核查超限,儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,提示更換試劑;舉例:利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。二、試劑空白吸光度測(cè)試方法1、測(cè)定待檢試劑在測(cè)定波長(zhǎng)、37℃±1℃條件下檢測(cè)蒸餾水的吸光度A;2、將試劑更換成蒸餾水,再測(cè)定吸光度B;3、...
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2012-128
一、Tris(Hydroxymethyl)aminomethane三羥甲基氨基甲烷分子式:NH2C(CH2OH)3,分子量:121.14TRIS,是一種zui常用的生物緩沖液,常配成PH值為6.8,7.4,8.0,8.8。其PH值隨溫度變化很大。一般來(lái)說(shuō),溫度每升高一度,PH值下降0.03。二、EDTA:EthyleneDiamineTetraaceticAcid乙二胺四乙酸分子式:C10H16N2O8分子量:292.248EDTA是化學(xué)中一種良好的配合劑,它有六個(gè)配位原子,...
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2012-125
化學(xué)試劑的種類很多,世界各國(guó)對(duì)化學(xué)試劑的分類和分級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)不盡一致。IUPAC(InternationalUnionofPureandAppliedChemistry理論和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)對(duì)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分類為:1、*:原子量標(biāo)準(zhǔn)。級(jí)zui接近的基準(zhǔn)物質(zhì)。2、B級(jí):和*zui接近的基準(zhǔn)物質(zhì)。3、C級(jí):含量為100+-0.02%的標(biāo)準(zhǔn)試劑4、D級(jí):含量為100+-0.05%的標(biāo)準(zhǔn)試劑5、E級(jí):以C級(jí)或D級(jí)為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比測(cè)定得到的純度的試劑化學(xué)試劑按用途可分為標(biāo)準(zhǔn)試劑,一般...
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2012-123
一、主要實(shí)驗(yàn)材料1、培養(yǎng)液為F-DMEM。2、小鼠周齡為7~8w的性成熟母小鼠和周齡為8w的種公鼠。二、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)的培養(yǎng)1、小鼠胚胎的準(zhǔn)備①性成熟母小鼠與種公鼠按1公(♂):2母(♀)比例合籠。②每天早上觀察母小鼠陰道口。有乳白色或蛋黃色凍膠狀物(陰道栓)即確定為懷孕。④見栓當(dāng)天上午定為懷孕的0.5d。③取懷孕12.5~14.5d母鼠,斷頸處死,無(wú)菌條件下暴露子宮。餿用鑷子提起近子宮頸端,分離子宮系膜,剪斷子宮角。⑤取出整個(gè)子宮,在無(wú)菌濾紙上吸干血跡,置于有...
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2012-1128
1、免疫脾細(xì)胞的制備制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。一般血清的制備,也可采用脾內(nèi)直接免疫法。2、骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選在融合前,骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過(guò)含8-AG的培養(yǎng)基篩選,防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性(恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活)。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),融合前24h換液一次,使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。3、細(xì)胞融合的關(guān)鍵:①技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。②融合試...
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2012-1123
抗體monoclonalantibody;McAb1、定義1:能與相應(yīng)抗原(表位)特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。所屬學(xué)科:免疫學(xué)(一級(jí)學(xué)科);免疫系統(tǒng)(二級(jí)學(xué)科);免疫分子(三級(jí)學(xué)科)2、定義2:在人和動(dòng)物體內(nèi),由于抗原或半抗原入侵刺激機(jī)體而在細(xì)胞中產(chǎn)生的免疫球蛋白。能可逆、非共價(jià)、特異地與相應(yīng)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合體。所屬學(xué)科:生物化學(xué)與分子生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科);總論(二級(jí)學(xué)科)3、定義3:機(jī)體內(nèi)B細(xì)胞在抗原刺激下產(chǎn)生的具有特異性功能的球蛋白。所屬學(xué)科:水產(chǎn)學(xué)(一級(jí)...
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2012-1121
一、優(yōu)點(diǎn)1、直接觀察活細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)。用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)和腫瘤學(xué)等多種學(xué)科研究。2、直接觀察細(xì)胞的變化可便于攝影。3、研究細(xì)胞種類如低等到高等到人類、胚胎到成體、正常組織到腫瘤。4、便于使用各種技術(shù):相差、熒光、電鏡、組化、同位素標(biāo)記等方法觀察和研究細(xì)胞狀況。5、是分子生物學(xué)和基因工程學(xué)的研究對(duì)象,也是其主要的組成部分。6、易于施用物理、化學(xué)生物的實(shí)驗(yàn)研究。7、易于提供大量生物性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,耗資少比較經(jīng)濟(jì)。8、成為生物制品單克隆抗體生產(chǎn)和基因...
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