玻璃儀器清洗規(guī)程

1、試管、燒杯、漏斗等玻璃儀器如無(wú)特殊要求，用洗衣粉刷洗內(nèi)壁，自來(lái)水沖凈后，純凈水潤(rùn)洗三次，以內(nèi)壁不掛水珠為準(zhǔn)，自然晾干。有效期為七日，過(guò)期后使用時(shí)重新洗滌。2、液相色譜、氣相色譜使用的進(jìn)樣瓶洗滌方法和原則與滴定管相同。3、效價(jià)用雙碟用完后，先浸入來(lái)蘇水中24h，取出超聲20分鐘，自來(lái)水逐個(gè)沖凈，純凈水潤(rùn)洗后，以碟上不掛水珠為準(zhǔn)自然晾干，裝入桶內(nèi)。160℃干烤2小時(shí)滅菌備用。有效期為七日，過(guò)期后使用時(shí)重新160℃干烤2小時(shí)即可。4、微生物限度測(cè)定用三角瓶、刻度吸管、試管、雙碟...

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抗體的基因重排

抗體的L鏈?zhǔn)怯蒀、V、J三個(gè)基因簇編碼的，H鏈由C、V、D、J四個(gè)基因簇編碼的。是編碼可變區(qū)，300個(gè)種類；編碼高變區(qū),有15～20個(gè)種類；編碼連接V、V有DJC的結(jié)合區(qū)，4～5個(gè)種類；編碼恒定區(qū)，有C僅有一種。這些外顯子通過(guò)多種多樣的重排，所合成出的肽鏈，還要再進(jìn)一步進(jìn)行L和H鏈組合，這樣zui后生成的抗體種類就非常多了。抗體基因重排是發(fā)生在淋巴細(xì)胞分化的時(shí)候。按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。1、IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的...

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常用的幾種抗原修復(fù)方法

1、微波爐加熱在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液（pH6.0）至沸騰后將組織芯片放入，斷電，間隔5-10分鐘，反復(fù)1-2次。2、高壓熱修復(fù)在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0）.蓋上不銹鋼鍋蓋，但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上，緩慢加壓，使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門(mén)將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源，置入涼水中，當(dāng)小閥門(mén)沉下去后打開(kāi)蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。（骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱...

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血清的滅活與分裝

一、化凍將血清（FetalBovineSerum，Hyclone）從－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化凍過(guò)夜；也可室溫（或浸于自來(lái)水中）化凍，化凍后若不馬上滅活，可以放入4℃冰箱暫時(shí)保存；二、滅活1、放入室溫的水浴鍋內(nèi)開(kāi)始加熱（同時(shí)放入一個(gè)內(nèi)裝200ml自來(lái)水的血清瓶，插入一根溫度計(jì)，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）；2、當(dāng)溫度計(jì)顯示56℃時(shí)，控制在此溫度30分鐘±3分鐘；若不小心使溫度上升超過(guò)56℃，則：若仍未超過(guò)60℃，且時(shí)間很短（比如：不超過(guò)5分鐘），則仍可使用；若超過(guò)6...

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ES細(xì)胞的凍存操作

1、常規(guī)方法將細(xì)胞消化成單細(xì)胞懸液；2、轉(zhuǎn)入試管，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；3、配適量?jī)龃嬉海楹?0%二甲亞砜（DMSO），10%FBS的DMEM培養(yǎng)液）；4、棄上清，每管加入1ml凍存液，吹打成細(xì)胞懸液（只要使ES細(xì)胞分散成3—5個(gè)細(xì)胞的小團(tuán)塊即可），轉(zhuǎn)入凍存管，作好標(biāo)簽；5.放入程序凍存盒內(nèi)24小時(shí)后轉(zhuǎn)入液氮罐中凍存。相關(guān)產(chǎn)品信息：凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑

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使用液氮應(yīng)注意的事項(xiàng)

1、準(zhǔn)備凍存管、凍存盒放置需液氮中保存的樣品。2、液氮中有三個(gè)取液氮容器，不宜直接將凍存管放于液氮罐中，這樣會(huì)使凍存管漂浮起來(lái)。固可用紗布、棉線將取氮容器口封住，保存樣品。3、取樣品時(shí)，需要使用研缽。研缽在使用前，需清洗，并用純酒精灼燒以充分滅菌。在研磨液氮保存的樣品時(shí)，需加入液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，再研磨。如此三次。可用消毒過(guò)的鑰匙將研缽中的組織樣品轉(zhuǎn)入EP管中。介于所取的樣品不能*轉(zhuǎn)移到EP管中，故而在取樣時(shí)需多取樣品，以免不夠。4、新買的液氮罐需用一定...

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冰箱存放樣品的幾點(diǎn)建議

一、提高冰箱空間使用率：1、在冰箱中制作必要的支架；2、使用凍存盒，替代各種手套、袋子、板架；3、采用節(jié)省空間的凍存管。二、對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存的重要樣品：實(shí)驗(yàn)室重要的菌種、組織、蛋白等樣品建議可選擇二維編碼管（2D管）進(jìn)行儲(chǔ)存，避免樣本/信息的丟失、錯(cuò)用、誤用，同時(shí)實(shí)現(xiàn)樣本的有效管理。相關(guān)產(chǎn)品信息：凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑

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樣品復(fù)蘇注意事項(xiàng)

一、樣品復(fù)蘇時(shí)的注意事項(xiàng)1、注意做好個(gè)人防護(hù)，如護(hù)目鏡、面罩、手套、防護(hù)服，避免炸傷2、盡量使用鑷子3、水浴鍋/燒杯上覆蓋毛巾二、樣品復(fù)蘇時(shí)1、對(duì)于未經(jīng)保護(hù)的凍存管，切忌快速扔進(jìn)水浴中。2、凍存管從液氮液相取出后必須在液氮?dú)庀嘀袃?chǔ)存24h，這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸，從而降低凍存管中的壓力。3、凍存管從液氮液相取出后快速放置于-20度冰箱30min，再進(jìn)行水浴復(fù)蘇。4、凍存管從液氮取出后，用手輕輕擰松管蓋，使液氮蒸發(fā)后再進(jìn)行水浴復(fù)蘇。5、對(duì)于不需水浴復(fù)蘇的樣品...

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